Cohorte retrospectiva de un solo centro. Las mismas 28 parejas hicieron un primer ICSI con gradientes y swim-up y, tras el fallo de ese ciclo, un segundo con el chip microfluídico. No hay grupo control en paralelo ni asignación al azar. Se comparan dos ciclos sucesivos de las mismas parejas.
Revista Internacional de Andrología · Volumen 21, artículo 100338 · 2023
Chip microfluídico con DSB alto: 28 parejas antes-después
«Microfluidic sperm sorting improves ICSI outcomes in patients with increased values of Double-Strand Breaks in sperm DNA»
Transparencia. Declarado en el propio artículo: Agustín García-Peiró, autor de correspondencia, tiene interés comercial en el dispositivo ZyMōt ICSI y en el ensayo Cometa para medir la fragmentación del ADN espermático. El estudio lo financian los centros Ginefiv y CIMAB, con una beca de Doctorado Industrial del Ministerio de Economía, Industria y Competitividad.
La pregunta
¿Cambia el resultado del ICSI si el semen se prepara con un chip microfluídico cuando hay roturas de doble cadena?
Las roturas de doble cadena (DSB, por sus siglas en inglés) del ADN espermático se han asociado con retrasos en la cinética embrionaria, fallos de implantación en ICSI y abortos de repetición. El Cometa Neutro las distingue de las roturas de cadena sencilla.
Los métodos habituales de preparación del semen, gradientes de densidad y swim-up, seleccionan por motilidad y necesitan centrifugar. Según los autores, reducen las roturas de cadena sencilla, pero no hay pruebas de que reduzcan las de doble cadena. Los dispositivos microfluídicos seleccionan sin centrifugación.
En las parejas de este estudio, el primer ICSI con gradientes y swim-up dio un embarazo clínico del 12,50 % por transferencia (2 de 16), y 12 de las 28 parejas no llegaron a tener un embrión transferible.
La pregunta del estudio: en parejas cuyo varón tiene un valor alto de roturas de doble cadena, ¿se asocia preparar el semen con el chip ZyMōt ICSI con mejores resultados que con gradientes y swim-up?
Sobre la prueba, el test de roturas de doble cadena y doble cadena frente a fragmentación total. Sobre la técnica, la revisión de dispositivos de microfluídica y el procesado del semen y la fragmentación.
Los resultados
Más embarazos bioquímicos y recién nacidos en el segundo ciclo; el embarazo clínico no alcanza significación
Resultados clínicos del primer y del segundo ciclo (%)
Tabla 2. Las cuatro primeras filas son por transferencia; el aborto, por embarazo clínico; la última, sobre las 28 parejas. Debajo de cada valor, el número de casos. Solo transferencias en fresco.
Embarazo bioquímico por transferencia
Embarazo clínico por transferencia
Recién nacido vivo por transferencia
Aborto por embarazo clínico
Ciclos con transferencia
Cómo leer las etiquetas. Las turquesas marcan las diferencias que el artículo da como significativas; las grises, las que no. En el primer ciclo hubo 3, 2, 0 y 2 casos en las cuatro primeras filas.
El laboratorio
Semen, ovocitos y embriones: sin diferencias significativas entre los dos ciclos
| Dato (Tabla 1) | 1.er ciclo | 2.º ciclo | p |
|---|---|---|---|
| Concentración espermática (10⁶/mL, media ± DE) | 35,28 ± 20,23 | 34,02 ± 21,77 | 0,270 |
| Morfología normal (%, media ± DE) | 2,78 ± 1,02 | 2,73 ± 1,45 | 0,900 |
| Motilidad progresiva (%, media ± DE) | 38,21 ± 8,82 | 38,08 ± 7,64 | 0,900 |
| Edad del varón (años) | 37,53 ± 3,28 | 38,33 ± 3,33 | 0,143 |
| Edad de la mujer (años) | 35,67 ± 3,43 | 36,47 ± 3,57 | 0,143 |
| Ovocitos obtenidos (total · media ± DE) | 324 · 11,57 ± 4,30 | 311 · 11,11 ± 7,67 | 0,336 |
| Ovocitos microinyectados | 258 · 9,21 ± 4,31 | 220 · 7,86 ± 4,83 | 0,152 |
| Ovocitos fecundados (2PN) | 136 · 4,86 ± 3,27 | 127 · 4,54 ± 4,34 | 0,365 |
| Tasa de fecundación | 0,51 ± 0,29 | 0,50 ± 0,27 | 0,870 |
| Blastocistos (total · media ± DE) | 56 · 2,00 ± 1,56 | 62 · 2,21 ± 2,28 | no consta |
| Blastocistos de grado A | 7 | 20 | 0,097 |
| Blastocistos de grado B | 18 | 13 | 0,445 |
| Blastocistos de grado C | 30 | 23 | 0,429 |
| Blastocistos de grado D | 1 | 6 | 0,134 |
Los autores destacan los blastocistos de grado A: 7 en el primer ciclo y 20 en el segundo. La diferencia no es significativa (p = 0,097) y piden confirmarla en una cohorte mayor. El artículo no da valor p para el total de blastocistos.
El método
Cuatro pasos, del primer ciclo al segundo
Quién entró
28 parejas infértiles tratadas con ICSI en GINEFIV (Madrid). En todas, el varón tenía roturas de doble cadena por encima del 60 % en el Cometa Neutro, un corte interno del centro; la media fue 71,18 % ± 9,88 %.
Se excluyó a los varones con valores normales, infecciones genitourinarias o alteraciones seminales graves, y a las mujeres con otra causa de infertilidad salvo la edad: trastornos hormonales, endometriosis, ovario poliquístico o factor tubárico.
Lo que fue igual
Estimulación con antagonista de la GnRH; desencadenamiento con análogo de la GnRH (0,2 mg) y hCG cuando tres o más folículos llegaban a 17 mm; punción a las 34-36 h. Estrógenos orales de 4 a 8 mg/día y progesterona tras la punción, hasta un máximo de 100 días si había embarazo.
Muestra tras 3-5 días de abstinencia y microinyección por el mismo embriólogo. No se registraron cambios de hábitos entre ciclos.
Lo que cambió
Primer ciclo: gradientes del 80 % y el 40 %, centrifugados a 1000 rpm durante 20 min, lavado a 1200 rpm durante 5 min y swim-up.
Tras el fallo de ese ciclo se midió la doble cadena y, unos meses después, se programó el segundo con el chip ZyMōt ICSI: cinco canales hidratados con 13 µL de medio, 1 µL de semen sin procesar y 30 min de incubación a 37 °C, sin centrifugar.
Qué se midió
Fecundación a las 18-20 h (dos pronúcleos) y blastocistos de grado A a D según los criterios ASEBIR. Embarazo bioquímico por β-hCG a los 14 días; clínico, por saco gestacional y latido en ecografía; aborto, sin latido tras un embarazo clínico.
Solo se analizan las transferencias en fresco. En el Cometa Neutro se clasificaron 200 células por muestra.
La letra pequeña
Las limitaciones que reconocen los autores
Salen de su discusión. Las citas son traducción del original.
Pocas parejas
Son 28 parejas y los autores piden más: estudios futuros con un número mayor de ciclos de ICSI deberían ayudar a confirmar estos resultados
.
No todos los embriones se valoraron
Señalan la imposibilidad de valorar el resultado clínico de todos los embriones obtenidos, de grado A a D
. Los resultados se basan en embriones A/B transferibles, y cuando hubo embarazo y nacido vivo, los demás embriones buenos de la pareja no se transfirieron.
Otros factores de la pareja
En el segundo ciclo, 11 parejas no tuvieron embrión transferible. Los autores escriben que otros factores maternos o paternos podrían estar influyendo, y en el primer ciclo mencionan la edad materna, la calidad ovocitaria tras la estimulación o la activación del ovocito.
Blastocistos A y euploidía
Proponen que el chip podría dar más embriones euploides y relacionan con ello el aumento de blastocistos de grado A, pero lo dejan como algo todavía en discusión
que una cohorte mayor tendría que confirmar.
«El dispositivo microfluídico ZyMōt ICSI mejoró los resultados reproductivos en parejas en las que el varón presentaba valores elevados de DSB, en comparación con el uso de técnicas convencionales de preparación del semen.»
«The ZyMōtTM ICSI microfluidic device improved the reproductive outcomes in couples where the male partner presented increased DSB values, when compared to the use of conventional semen preparation techniques.»
Lara-Cerrillo S, Urda Muñoz C, de la Casa Heras M, et al. Revista Internacional de Andrología, 2023. Conclusión del resumen.Coherencia interna
Cómo resume el artículo sus propios resultados
- El embarazo clínico. El resumen lo incluye entre los resultados clínicos «estadísticamente mejores» con el chip. En la Tabla 2 no lleva la marca de significación y su p es 0,070. La ficha lo trata como no significativo.
- Qué son los «aumentos». El artículo habla de un incremento del 28,31 % en el embarazo bioquímico o del 35,29 % en los nacidos vivos. Son diferencias en puntos porcentuales por transferencia entre los dos ciclos. La ficha da el porcentaje de cada ciclo.
Para citarlo
La referencia
Leer el artículo original · Financiación: centros Ginefiv y CIMAB y beca de Doctorado Industrial (Ministerio de Economía, Industria y Competitividad; Agencia Estatal de Investigación) · Conflicto de interés declarado: Agustín García-Peiró tiene interés comercial en el dispositivo ZyMōt ICSI y en el ensayo Cometa; el resto de autores no declara ninguno.
Código AdrIA · serie «papers legibles»
