Esperma testicular fresco o criopreservado con DFI elevado (Reprod Biol Endocrinol 2026)

Article in Press

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Reproductive Biology and Endocrinology · 2026 · Article in Press

Esperma testicular fresco o congelado: diferencia no significativa, muestra pequeña

En 60 parejas con fragmentación del ADN espermático elevada que pasaron por TESE e ICSI, el nacido vivo acumulado fue del 42,5 % con esperma testicular fresco y del 25,0 % con criopreservado. El riesgo relativo es 1,62, con un intervalo de 0,70 a 3,76 que incluye el 1.

«The impact of fresh versus cryopreserved testicular sperm on in-vitro fertilization outcomes in couples with elevated sperm DNA fragmentation: a retrospective cohort study»

Dana R. Siegel, Laura K. Kaizer, Mary D. Sammel y Cassandra Roeca.
University of Colorado Anschutz Medical Campus, Department of Obstetrics and Gynecology (Aurora, Colorado); Shady Grove Fertility (Greenwood Village, Colorado); Colorado School of Public Health, Department of Biostatistics & Informatics (Aurora, Colorado). Estados Unidos.

Estudio observacional · cohorte retrospectiva 60 hombres · 40 con fresco, 20 con criopreservado DOI 10.1186/s12958-026-01594-1
Qué tipo de evidencia es Es un estudio observacional: una cohorte retrospectiva de una red de clínicas de Estados Unidos, con datos de 2017 a 2022. Usar el esperma fresco o congelado lo decidieron el médico y la pareja, no el azar, así que las diferencias que aparezcan son asociaciones y no demuestran causa. Los propios autores piden leer sus resultados como generadores de hipótesis.
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El problema, en una frase. Cuando se recurre a la extracción testicular de espermatozoides por una fragmentación del ADN elevada, el esperma puede usarse en fresco el día de la punción o congelarse para después, y no se sabía si esa elección cambia el resultado en estos hombres.

La pregunta

¿Congelar el esperma testicular cambia el resultado cuando el ADN espermático está fragmentado?

El índice de fragmentación del ADN espermático (DFI) mide el porcentaje de espermatozoides con la cromatina dañada. Los autores recuerdan que la AUA y la ASRM recomiendan estudiarlo en parejas con fallos de reproducción asistida o pérdida gestacional recurrente.

Una de las opciones cuando sale alto es usar espermatozoides extraídos del testículo (TESE) con ICSI. Según los estudios que cita el artículo, el esperma testicular tiene menos fragmentación que el eyaculado.

Tras la extracción, las guías aceptan dos caminos: usar el esperma en fresco, coordinando la cirugía con la punción ovárica, o congelarlo. Congelar evita cancelar un ciclo por no encontrar espermatozoides el día de la punción, da margen al laboratorio y ahorra repetir la cirugía. Algunos trabajos citados en el artículo asocian la congelación con menos espermatozoides vivos y menos implantación.

Según los autores, en hombres operados precisamente por un DFI alto el efecto de congelar seguía sin conocerse. La pregunta: en parejas que pasan por TESE e ICSI por una fragmentación elevada, ¿difieren el nacido vivo, el embarazo, el aborto, la fecundación y el desarrollo a blastocisto entre el esperma testicular fresco y el criopreservado?

Los resultados

Nacido vivo acumulado: RR 1,62, con un intervalo que incluye el 1

El porcentaje de nacido vivo fue numéricamente más alto con esperma fresco, y ninguna diferencia entre grupos alcanzó la significación estadística. El intervalo del riesgo relativo va de 0,70 a 3,76, así que los datos son compatibles tanto con menos como con más nacido vivo con esperma fresco. Los autores atribuyen la falta de significación al tamaño de la muestra.

RR 1,62
Nacido vivo acumulado con esperma fresco frente a criopreservado, en todos los ciclos iniciados
IC95 % 0,70⁠–⁠3,76 · sin ajustar · ajustado por PGT y edad materna ≥ 35 en un análisis de sensibilidad: 1,71 (0,82⁠–⁠3,57)
42,5 % frente a 25,0 %
Nacido vivo acumulado, fresco frente a criopreservado
Los autores hablan de una diferencia absoluta del 17,5 % que no alcanza la significación
22 de 60 parejas
Se quedaron sin ningún embrión que transferir tras el primer ciclo de ICSI
40 usaron esperma fresco y 20 criopreservado
Más de 4 veces
Más participantes harían falta para detectar con un 80 % de potencia una reducción del 41 % del nacido vivo con esperma criopreservado
Cálculo de potencia de los propios autores

Riesgo relativo de nacido vivo acumulado

Con intervalo de confianza del 95 %. Escala logarítmica; la línea vertical marca el 1.

RR = fresco ÷ criopreservado. A la derecha de la línea, más nacido vivo con esperma fresco; a la izquierda, menos. Los dos intervalos cruzan la línea.
Sin ajustar · análisis principal, todos los ciclos iniciados
RR 1,620,70 – 3,76
sin diferencia significativa · ninguna covariable cambió la estimación lo bastante para entrar en el modelo
Ajustado por PGT y edad materna ≥ 35
RR 1,710,82 – 3,57
análisis de sensibilidad · sin diferencia significativa
0,5124
← menos con frescomás con fresco →

Desenlaces por grupo

Arriba, porcentajes acumulados sobre todos los ciclos iniciados. Abajo, medianas de laboratorio del primer ciclo, con su rango intercuartílico. Escala de 0 a 100 %.

Esperma testicular fresco · n = 40 Esperma testicular criopreservado · n = 20

Desenlaces clínicos acumuladosTodos los ciclos iniciados, incluidas las parejas que no llegaron a transferir

Nacido vivo · desenlace principal
Fresco
42,5 %
Congelado
25,0 %
sin diferencia significativa · RR 1,62 (0,70⁠–⁠3,76)
Embarazo clínico
Fresco
55,0 %
Congelado
35,0 %
sin diferencia significativa · p = 0,144
Aborto
Fresco
10 %
Congelado
5,0 %
sin diferencia significativa · p = 0,185

Laboratorio, primer ciclo tras la TESEMedianas por pareja

Tasa de fecundación · 2PN por ovocito maduro inyectado
Fresco
48,8 %RIC 33,5⁠–⁠61,3
Congelado
43,7 %RIC 32,8⁠–⁠63,1
sin diferencia significativa · p = 0,937
Conversión a blastocisto · blastocistos de día 5 a 7 por cigoto 2PN
Fresco
16,7 %RIC 0,0⁠–⁠40,0
Congelado
26,1 %RIC 16,7⁠–⁠52,8
sin diferencia significativa · p = 0,106 · aquí el criopreservado queda por encima

Ovocitos maduros, mediana: 15,0 con fresco (RIC 9,5⁠–⁠19,5) y 19,0 con criopreservado (RIC 11,0⁠–⁠30,0); p = 0,254. DFI de partida, mediana: 46,5 % (RIC 34,0⁠–⁠59,0) frente a 48,0 % (RIC 38,0⁠–⁠64,0); p = 0,525. El 55 % de las parejas hizo PGT-A, sin diferencia entre grupos, y el 82 % recibió un solo embrión por transferencia. El número de transferencias no difirió (p = 0,714), y entre las 22 parejas sin embrión el DFI tampoco difería según el tipo de esperma (p = 0,884).

Solo las parejas que llegaron a transferir

Subgrupo que excluye a las 22 parejas sin embrión. El artículo no da cuántas parejas quedan en cada grupo.

AcumuladoFrescoCriopreservadop
Nacido vivo65,4 %41,7 %0,167
Embarazo clínico84,6 %58,3 %0,108
Aborto15,4 %8,3 %> 0,999

En la primera transferencia tampoco hubo diferencias significativas en embarazo clínico (p = 0,064), aborto (p > 0,999) ni nacido vivo (p = 0,096). Diez parejas sin embrión tras usar esperma fresco repitieron la ICSI con esperma congelado; comparadas consigo mismas, no hubo diferencias significativas en ovocitos maduros, fecundación ni blastocistos, con una muestra que los autores califican de muy pequeña y cuya tabla no viene en esta versión.

El método

Cómo se hizo

1

A quién se incluyó

Hombres operados de TESE por un DFI elevado antes de una ICSI, en tres centros de la red US Fertility (Shady Grove Fertility, RMA of New York e IVF Florida), del 1 de enero de 2017 al 31 de diciembre de 2022.

El DFI se midió en un mismo laboratorio con dispersión de la cromatina (HaloSperm G2); por debajo del 20 % es normal y quedaba fuera. También se excluyó a mujeres de más de 42 años, gametos de donante y TESE previas al test. De 68 pacientes quedaron 60.

2

Qué recibieron todos

Estimulación ovárica con los protocolos habituales de cada centro, punción 35⁠–⁠36 horas después del desencadenante e ICSI de los ovocitos maduros.

Todos los embriones se vitrificaron en blastocisto y se transfirieron en diferido, con el endometrio de al menos 7 mm y la transferencia unas 123 horas después de empezar la progesterona.

3

Qué cambiaba entre grupos

El esperma testicular se usó en fresco, coordinado con la punción, o criopreservado por enfriamiento lento y descongelado el día de la ICSI.

Lo decidieron de antemano el médico y la pareja. Haber fracasado antes con esperma fresco no era requisito para entrar en el grupo del congelado. El PGT-A y el número de embriones a transferir también se decidían caso a caso.

4

Cómo se midió

Desenlace principal: nacido vivo acumulado, un recién nacido viable a partir de la semana 24, con el primer ciclo de ICSI tras la TESE y todas las transferencias de sus embriones.

Regresión log-binomial: una covariable entraba si cambiaba el logaritmo del riesgo un 20 % o más. Ninguna lo hizo, así que el modelo principal quedó sin ajustar.

La letra pequeña

Lo que los autores reconocen de su propio trabajo

Estas son las limitaciones que señala el artículo, con sus palabras cuando se citan.

Muestra pequeña, poca potencia

El tamaño de la muestra redujo de forma importante la potencia estadística y limitó la capacidad de distinguir resultados significativos de diferencias clínicamente relevantes. Para afirmar que el congelado no es inferior al fresco en estos pacientes, dicen, haría falta un estudio mucho mayor.

Sin ajuste por confusores

Hubo tan pocos nacidos vivos que no pudieron estimar un modelo ajustado por posibles factores de confusión. Por tanto, solo presentamos asociaciones no ajustadas.

Datos masculinos incompletos

Tabaco, fiebre o enfermedad reciente, IMC, medicación, infecciones genitourinarias y cualquier intervención entre el test de DFI y la TESE no se registraron de forma sistemática en la historia clínica y quedaron fuera del análisis.

Sin la indicación del test

No se conocía el motivo clínico por el que se pidió el test de fragmentación, así que no pudieron valorar si los resultados cambiaban según la indicación del test o de la TESE. El diseño retrospectivo, añaden, limita la recogida de datos y la generalización.

Lo que no cuadra en esta versión del manuscrito

  1. Faltan las tablas. El texto remite a las Tablas 1, 2 y 3 y a la Tabla suplementaria 1, pero el PDF acaba en las referencias. No hay recuentos por grupo de ningún desenlace ni las características de partida (edades, IMC, FSH, AMH, recuento de folículos antrales) que el texto describe como comparables.
  2. Un valor p difícil de conciliar. Para el nacido vivo acumulado (42,5 % frente a 25,0 %) el artículo da p = 0,656, mientras que el embarazo clínico (55,0 % frente a 35,0 %) da p = 0,144 y el aborto (10 % frente a 5,0 %) p = 0,185; en la primera transferencia el nacido vivo da p = 0,096 y en las parejas que transfirieron p = 0,167. Sin la tabla no se puede comprobar. Por eso esta ficha se apoya en el riesgo relativo con su intervalo.
  3. Ajustado o no ajustado. Las limitaciones dicen que solo se presentan asociaciones no ajustadas, y los resultados incluyen un riesgo relativo ajustado de 1,71 (0,82⁠–⁠3,57). Ese ajuste es un análisis de sensibilidad, y así se rotula aquí.
  4. La indicación de la TESE. Los métodos la atribuyen al DFI elevado; el apartado de protocolos, al fracaso de FIV junto con un DFI alto; y las limitaciones dicen que la indicación del test no estaba disponible.
  5. El análisis pareado. En las diez parejas que repitieron con esperma congelado, las diferencias se dan con signo negativo y se describen como valores algo más bajos con fresco. Sin la tabla suplementaria no se puede saber en qué sentido se hizo la resta.
  6. El aborto se define como pérdida tras un embarazo clínico, pero se expresa en porcentaje de todos los ciclos iniciados, sin denominador explícito.
  7. La discusión dice que sus resultados apoyan que el esperma quirúrgico fresco o congelado es aceptable para ICSI, mientras reconoce que establecer la no inferioridad del congelado exigiría un estudio mucho mayor.

Financiación y contexto. El artículo declara que no tuvo financiación y que los autores no tienen conflictos de interés. La primera y la última autora figuran afiliadas a Shady Grove Fertility, uno de los centros de la red cuyos datos se analizan. El trabajo recibió el Prize Paper Award de la Society for Male Reproduction and Urology en el congreso de la ASRM de 2024.

«En esta cohorte retrospectiva de pacientes con fragmentación del ADN espermático elevada sometidos a TESE, el esperma testicular fresco se asoció con tasas acumuladas de nacido vivo numéricamente más altas que el criopreservado, aunque estos resultados no fueron estadísticamente significativos, probablemente por el pequeño tamaño muestral y la consiguiente falta de potencia del estudio. Estos hallazgos deben considerarse generadores de hipótesis, y un estudio prospectivo mayor, de no inferioridad y potencialmente pragmático ayudaría a reforzarlos.»

«In this retrospective cohort of patients with elevated SDF undergoing TESE, fresh testicular sperm was associated with numerically higher cumulative live birth rates as compared to cryopreserved testicular sperm, though these results were not statistically significant likely due to the small sample size and therefore underpowered study. These findings should be considered hypothesis-generating and a larger prospective, non-inferior and potentially pragmatic study would help to strengthen these findings.»

Siegel DR et al. Reproductive Biology and Endocrinology, 2026. Conclusión del artículo.

Para citarlo

La referencia

Siegel DR, Kaizer LK, Sammel MD, Roeca C. The impact of fresh versus cryopreserved testicular sperm on in-vitro fertilization outcomes in couples with elevated sperm DNA fragmentation: a retrospective cohort study. Reprod Biol Endocrinol. 2026. Article in Press. doi:10.1186/s12958-026-01594-1

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Otras fichas sobre ADN espermático

Las tres estudian la relación entre la fragmentación y el embrión. Ninguna compara esperma testicular fresco y congelado.

Esta ficha se ha elaborado sobre el artículo original, sin añadir datos ni interpretaciones ajenas al texto. Cada cifra se ha verificado contra el resumen y el texto del manuscrito, porque esta versión no incluye las tablas. Donde el propio artículo no cuadra, se dice. Enlaza al artículo para quien quiera leerlo completo.
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